Elektroforesis gel adalah salah satu kaedah utama yang digunakan dalam biologi molekul untuk analisis DNA.Kaedah ini melibatkan penghijrahan serpihan DNA melalui gel, di mana ia dipisahkan berdasarkan saiz atau bentuk.Walau bagaimanapun, adakah anda pernah mengalami sebarang ralat semasa eksperimen elektroforesis anda, seperti jalur berlumur pada gel agarose, atau tiada jalur pada gel?Apakah yang boleh menjadi punca kesilapan ini?
Juruteknik kami telah meringkaskan beberapa penyelesaian masalah di sini untuk rujukan anda.
1. Jalur berlumur pada gel agarose
●DNA telah terdegradasi.Elakkan pencemaran nuklease.
● Penampan elektroforesis tidak segar.Selepas penggunaan berulang penampan elektroforesis, kekuatan ion berkurangan, dan nilai pHnya meningkat, jadi kapasiti penampan melemah, yang menjejaskan kesan elektroforesis.Adalah disyorkan untuk menggantikan penampan elektroforesis dengan kerap.
● Keadaan elektroforesis yang tidak betul telah digunakan.Jangan biarkan voltan melebihi 20 V/cm, dan kekalkan suhu <30° C semasa elektroforesis.Untuk elektroforesis untai DNA gergasi, suhu hendaklah <15° C. Periksa penimbal elektroforesis mempunyai kapasiti penimbal yang mencukupi.
● Terlalu banyak DNA telah dimuatkan pada gel.Kurangkan jumlah DNA.
● Terlalu banyak garam dalam DNA.Gunakan pemendakan etanol untuk membuang lebihan garam secara lebih awal.
● DNA telah tercemar dengan protein.Gunakan pengekstrakan fenol untuk mengeluarkan protein secara terperinci.
● DNA telah didenaturasi.Jangan panaskan sebelum elektroforesis.Cairkan DNA dalam penimbal dengan 20 mM NaCl.
2. Anomali migrasi jalur DNA
● Pengubahsuaian tapak COS bagi serpihan λHind III.Panaskan DNA selama 5 minit di bawah 65° C sebelum elektroforesis, dan kemudian sejukkan pada unit ais selama 5 minit.
● Keadaan elektroforesis yang tidak betul telah digunakan.Jangan biarkan voltan melebihi 20 V/cm, dan kekalkan suhu <30° C semasa elektroforesis.Periksa penampan elektroforesis mempunyai kapasiti penampan yang mencukupi.
● DNA telah didenaturasi.Jangan panaskan sebelum elektroforesis.Cairkan DNA dalam penimbal dengan 20 mM NaCl.
3. Pengsan atau tiada jalur DNA pada gel agarose
● Tidak mencukupi kuantiti atau kepekatan DNA yang dimuatkan pada gel.Meningkatkan jumlah DNA.Elektroforesis gel poliakrilamida adalah lebih sensitif sedikit daripada elektroforesis agarose, dan pemuatan sampel boleh dikurangkan dengan sewajarnya.
● DNA telah terdegradasi.Elakkan pencemaran nuklease.
● DNA telah dielektroforesis daripada gel.Elektroforesis gel untuk masa yang lebih singkat, gunakan voltan yang lebih rendah, atau gunakan gel peratus yang lebih tinggi.
● Sumber cahaya W yang tidak betul telah digunakan untuk visualisasi DNA yang diwarnai etidium bromida.Gunakan cahaya gelombang pendek (254 nm) W untuk kepekaan yang lebih besar.
4. Jalur DNA hilang
●DNA saiz kecil telah dielektroforesis daripada gel.Elektroforesis gel untuk masa yang lebih singkat, gunakan voltan yang lebih rendah, atau gunakan gel peratus yang lebih tinggi.
● Sukar untuk membezakan jalur DNA bagi molekul yang serupa.Tingkatkan masa elektroforesis, dan periksa kepekatandaripada gel untuk memastikan betul peratus gel untuk digunakan.
● DNA telah didenaturasi.Jangan panaskan sebelum elektroforesis.Cairkan DNA dalam penimbal dengan 20 mM NaCl.
● Helai DNA adalah besar, dan elektroforesis gel konvensional tidak sesuai.Menganalisis elektroforesis gel nadi.Apakah isu lain yang anda hadapi dengan elektroforesis gel agarose?Kami akan meneliti lebih lanjut untuk panduan pada masa hadapan.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) ialah sebuah syarikat khusus yang memfokuskan pada produk berkaitan elektroforesis di China.Kisahnya bermula pada tahun 1970 apabila China masih belum memasuki masa reformasi dan pembukaan.Melalui pembangunan bertahun-tahun, Liuyi Bitotech mempunyai jenama sendiri, yang dikenali sebagai Jenama Liuyi dalam pasaran domestik untuk produk elektroforesis.
Jenama Liuyi mempunyai sejarah lebih 50 tahun di China dan syarikat itu boleh menyediakan produk yang stabil dan berkualiti tinggi di seluruh dunia.Melalui pembangunan bertahun-tahun, ia adalah layak untuk pilihan anda!
Sel elektroforesis mendatar (tangki/ruang) Liuyi Biotech adalah berkualiti tinggi dengan penampilan yang baik.Dengan saiz dulang gel yang berbeza, mereka boleh memenuhi keperluan percubaan anda yang berbeza.Kami mempunyai pasukan teknikal dan kilang kami sendiri.Dari reka bentuk hingga pembuatan, bahan mentah hingga bahagian utama, kami boleh mengawal keseluruhan proses.Siri DYCP 31 adalah untuk elektroforesis DNA, yang merupakan modelDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, danDYCP-31E.Perbezaan antaranya ialah saiz gel dan harga.Kami menyediakan saiz penuh produk untuk pelanggan kami.model ituDYCP-32Cboleh membuat gel terbesar 250mm * 250mm.
Sementara itu, kami mengesyorkan bekalan kuasa elektroforesis kamiDYY-6C,DYY-6DdanDYY-10Cuntuk sel elektroforesis kami (tangki/kebuk) siri DYCP-31 dan 32.
Jika anda mahukan maklumat lanjut tentang produk, sila lawati laman web ini untuk mendapatkan lebih banyak, dan dialu-alukan untuk menghubungi kami melalui e-mel untuk memberitahu kami apa yang anda mahukan, dan lihat jika kami boleh menyediakan penyelesaian untuk anda.
Untuk maklumat lanjut tentang kami, sila hubungi kami melalui e-mel[e-mel dilindungi], [e-mel dilindungi].
Masa siaran: Mei-09-2022