Ujian Komet (Single Cell Gel Electrophoresis, SCGE) ialah teknik sensitif dan pantas yang digunakan terutamanya untuk mengesan kerosakan dan pembaikan DNA dalam sel individu. Nama "Comet Assay" berasal daripada ciri bentuk seperti komet yang muncul dalam keputusan: nukleus sel membentuk "kepala", manakala serpihan DNA yang rosak berhijrah, mencipta "ekor" menyerupai komet.
Prinsip
Prinsip Ujian Komet adalah berdasarkan penghijrahan serpihan DNA dalam medan elektrik. DNA yang utuh kekal dalam nukleus sel, manakala DNA yang rosak atau berpecah-belah berhijrah ke arah anod, membentuk "ekor" komet. Panjang dan keamatan ekor adalah berkadar terus dengan tahap kerosakan DNA.
Prosedur
- Penyediaan Sel: Sel yang akan diuji dicampur dengan agarosa takat lebur rendah dan dihamparkan pada slaid mikroskop untuk membentuk lapisan seragam.
- Lisis Sel: Slaid direndam dalam larutan lisis untuk mengeluarkan membran sel dan membran nuklear, mendedahkan DNA.
- Elektroforesis: Slaid diletakkan di dalam ruang elektroforesis di bawah keadaan alkali atau neutral. Serpihan DNA yang rosak berhijrah ke arah elektrod positif di bawah pengaruh medan elektrik.
- mengotorkan: Selepas elektroforesis, slaid diwarnakan dengan pewarna pendarfluor (cth, etidium bromida) untuk menggambarkan DNA.
- Analisis Mikroskopik: Menggunakan mikroskop pendarfluor atau perisian khusus, bentuk komet dianalisis, dan parameter seperti panjang dan keamatan ekor diukur.
Imej daripada biorender
Analisis Data
Keputusan daripada Ujian Komet dinilai berdasarkan beberapa parameter utama:
- Panjang Ekor: Mewakili jarak pemindahan DNA, menunjukkan tahap kerosakan DNA.
- Kandungan DNA Ekor: Peratusan DNA yang berhijrah ke ekor, sering digunakan sebagai ukuran kuantitatif kerosakan DNA.
- Detik Ekor Zaitun (OTM): Menggabungkan kedua-dua panjang ekor dan kandungan DNA ekor untuk memberikan ukuran kerosakan DNA yang lebih komprehensif.
Aplikasi
- Kajian Genotoksisiti: Ujian Komet digunakan secara meluas untuk menilai kesan bahan kimia, ubat dan sinaran pada DNA sel, menjadikannya alat utama untuk ujian genotoksisiti.
- Toksikologi Persekitaran: Ia membantu dalam menganalisis kesan pencemar alam sekitar ke atas DNA organisma, memberikan pandangan tentang keselamatan ekosistem.
- Penyelidikan Perubatan dan Klinikal: Ujian Komet digunakan dalam mengkaji mekanisme pembaikan DNA, kanser, dan penyakit berkaitan DNA lain. Ia juga menilai kesan terapi kanser seperti radioterapi dan kemoterapi ke atas DNA.
- Sains Makanan dan Pertanian: Digunakan untuk menilai keselamatan racun perosak, bahan tambahan makanan, dan bahan lain, dan untuk mengkaji kesan toksiknya dalam model haiwan.
Kelebihan
- Kepekaan Tinggi: Mampu mengesan tahap kerosakan DNA yang rendah.
- Operasi Mudah: Teknik ini mudah, menjadikannya sesuai untuk saringan tinggi.
- Aplikasi Luas: Ia boleh digunakan pada pelbagai jenis sel, termasuk sel haiwan dan tumbuhan.
- Cabaran Kuantifikasi: Semasa menyediakan data kualitatif mengenai kerosakan DNA, analisis kuantitatif banyak bergantung pada perisian dan teknik analisis imej.
- Keadaan Eksperimen: Keputusan boleh dipengaruhi oleh faktor seperti masa elektroforesis dan pH, yang memerlukan kawalan berhati-hati terhadap keadaan eksperimen.
Had
Ujian Komet ialah alat yang tidak ternilai dalam penyelidikan bioperubatan, sains alam sekitar, dan pembangunan ubat kerana fleksibiliti dan kepekaan yang tinggi dalam mengesan kerosakan dan pembaikan DNA. Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology)menawarkan ruang elektroforesis mendatar untuk ujian komet. Selamat datang untuk menghubungi kami untuk membincangkan tentangUjian Kometprotokol.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) mempunyai pengkhususan dalam pembuatan instrumen elektroforesis selama lebih daripada 50 tahun dengan pasukan teknikal profesional dan pusat R&D kami sendiri. Kami mempunyai barisan pengeluaran yang boleh dipercayai dan lengkap dari reka bentuk hingga pemeriksaan, dan gudang, serta sokongan pemasaran. Produk utama kami ialah Sel Elektroforesis (tangki/ruang), Bekalan Kuasa Elektroforesis, Transilluminator LED Biru, Transilluminator UV, Sistem Imej & Analisis Gel dan lain-lain. Kami juga membekalkan instrumen makmal seperti instrumen PCR, pengadun vorteks dan emparan untuk makmal.
Jika anda mempunyai sebarang pelan pembelian untuk produk kami, sila jangan teragak-agak untuk menghubungi kami. Anda boleh menghantar mesej kepada kami melalui e-mel[e-mel dilindungi]atau[e-mel dilindungi], atau sila hubungi kami di +86 15810650221 atau tambah Whatsapp +86 15810650221, atau Wechat: 15810650221.
Sila Imbas kod QR untuk ditambahkan pada Whatsapp atau WeChat.
Masa siaran: Sep-20-2024