Mengoptimumkan Elektroforesis Gel: Amalan Terbaik untuk Jumlah Sampel, Voltan dan Masa

pengenalan

Elektroforesis gel ialah teknik asas dalam biologi molekul, digunakan secara meluas untuk pemisahan protein, asid nukleik, dan makromolekul lain. Kawalan yang betul ke atas isipadu sampel, voltan, dan masa elektroforesis adalah penting untuk mencapai keputusan yang tepat dan boleh dihasilkan semula.Rakan sekerja makmal kami menawarkanamalan terbaik untuk menguruskan parameter ini semasa elektroforesis gel SDS-PAGE.

3

Produk elektroforesis gel Bioteknologi Beijing Liuyi

Jumlah Sampel: Memastikan Ketekalan

Apabila melakukan elektroforesis SDS-PAGE, volum sampel ialah faktor utama yang boleh memberi kesan ketara pada resolusi keputusan anda. Secara amnya disyorkan untuk memuatkan 10 µL jumlah protein setiap telaga. Untuk memastikan ketekalan dan mengelakkan penyebaran sampel antara telaga bersebelahan, adalah penting untuk memuatkan isipadu yang sama 1x penimbal pemuatan dalam mana-mana telaga kosong. Langkah berjaga-jaga ini membantu mengelakkan penyebaran sampel ke lorong jiran, yang boleh berlaku jika telaga dibiarkan kosong.

Sebelum memuatkan sampel anda, sentiasa mulakan dengan menambah penanda berat molekul pada satu telaga. Ini membolehkan pengecaman mudah saiz protein selepas elektroforesis.

1

Kawalan Voltan: Mengimbangi Kelajuan dan Resolusi

Voltan yang digunakan semasa elektroforesis secara langsung mempengaruhi kedua-dua kelajuan di mana sampel berhijrah melalui gel dan resolusi pemisahan. Untuk SDS-PAGE, adalah dinasihatkan untuk bermula dengan voltan rendah sekitar 80V. Voltan rendah awal ini membolehkan sampel berhijrah secara perlahan dan sekata, menumpukan mereka dalam jalur tajam semasa mereka memasuki gel pemisah.

Sebaik sahaja sampel telah memasuki gel pemisah sepenuhnya, voltan boleh ditingkatkan kepada 120V. Voltan yang lebih tinggi ini mempercepatkan penghijrahan, memastikan bahawa protein diasingkan dengan cekap mengikut berat molekulnya. Adalah penting untuk memantau kemajuan bahagian depan pewarna biru bromofenol, yang menunjukkan penyiapan elektroforesis. Untuk gel dengan kepekatan 10-12%, 80-90 minit biasanya mencukupi; namun, untuk 15% gel, anda mungkin perlu memanjangkan sedikit masa larian.

Pengurusan Masa: Mengetahui Masa Berhenti

Masa adalah satu lagi faktor kritikal dalam elektroforesis gel. Menjalankan gel untuk tempoh yang terlalu lama atau terlalu singkat boleh menyebabkan pemisahan yang tidak optimum. Penghijrahan pewarna biru bromofenol adalah penunjuk yang berguna: apabila ia mencapai bahagian bawah gel, biasanya masa untuk menghentikan larian. Untuk gel standard, seperti 10-12%, tempoh elektroforesis kira-kira 80-90 minit biasanya mencukupi. Untuk gel peratusan yang lebih tinggi, seperti 15%, masa larian harus dilanjutkan untuk memastikan pengasingan lengkap protein.

Pengurusan Penampan: Menggunakan Semula dan Menyediakan Penampan

Penampan elektroforesis boleh digunakan semula 1-2 kali, bergantung pada keadaan khusus makmal anda. Walau bagaimanapun, untuk hasil yang optimum, adalah disyorkan untuk menyediakan penimbal 10x segar dan mencairkannya sebelum digunakan. Ini memastikan bahawa penimbal mengekalkan keberkesanannya, membawa kepada hasil elektroforesis yang lebih dipercayai.

2

Produk elektroforesis gel Bioteknologi Beijing Liuyi

Dengan mengawal isipadu sampel, voltan dan masa elektroforesis dengan teliti, anda boleh meningkatkan dengan ketara ketepatan dan kebolehulangan hasil elektroforesis gel anda. Melaksanakan amalan terbaik ini dalam kerja makmal anda akan membantu anda mencapai jalur yang lebih jelas dan berbeza, yang membawa kepada data yang lebih baik untuk analisis hiliran.

Jika anda mempunyai kaedah yang lebih baik untuk mengoptimumkan eksperimen elektroforesis gel, dialu-alukan untuk berbincang dengan kami!

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) mempunyai pengkhususan dalam pembuatan instrumen elektroforesis selama lebih daripada 50 tahun dengan pasukan teknikal profesional dan pusat R&D kami sendiri. Kami mempunyai barisan pengeluaran yang boleh dipercayai dan lengkap dari reka bentuk hingga pemeriksaan, dan gudang, serta sokongan pemasaran. Produk utama kami ialah Sel Elektroforesis (tangki/ruang), Bekalan Kuasa Elektroforesis, Transilluminator LED Biru, Transilluminator UV, Sistem Imej & Analisis Gel dan lain-lain. Kami juga membekalkan instrumen makmal seperti instrumen PCR, pengadun vorteks dan emparan untuk makmal.

Jika anda mempunyai sebarang pelan pembelian untuk produk kami, sila jangan teragak-agak untuk menghubungi kami. Anda boleh menghantar mesej kepada kami melalui e-mel[e-mel dilindungi]atau[e-mel dilindungi], atau sila hubungi kami di +86 15810650221 atau tambah Whatsapp +86 15810650221, atau Wechat: 15810650221.

Sila Imbas kod QR untuk ditambahkan pada Whatsapp atau WeChat.

2


Masa siaran: Ogos-20-2024