Penyediaan Sampel danMemuatkan
Disebabkan penggunaan sistem penimbal berterusan tanpa menyusun gel dalam kebanyakan kes, sampel harus mempunyai kepekatan yang sesuai dan isipadu yang kecil. Gunakan apipetuntuk menambah sampel secara perlahan, dengan 5-10 μg setiap telaga, untuk mengelakkan penurunan yang ketara dalam resolusi. bilamemuatkan sampel, bekalan kuasa mesti dimatikan. Sampel hendaklah mengandungi pewarna penunjuk (0.025% bromofenol biru atau oren) dan sukrosa (10-15%) atau gliserol (5-10%) untuk meningkatkan ketumpatannya, menumpukan sampel, dan mengelakkan resapan. Walau bagaimanapun, kadangkala sukrosa atau gliserol boleh menyebabkan jalur berbentuk U dalam hasil elektroforesis, yang boleh dielakkan dengan menggunakan 2.5% Ficoll (polyvinylpyrrolidone).
Elektroforesis
Voltan untuk elektroforesis ialah 5-15 V/cm, biasanya sekitar 10 V/cm. Untuk pemisahan molekul besar, voltan harus lebih rendah, biasanya tidak melebihi 5 V/cm.
mengotorkan
Etidium bromida (EB) pewarna pendarfluor biasanya digunakan untuk pewarnaan untuk memerhati jalur DNA dalam gel agarose. EB boleh memasukkan antara pasangan asas molekul DNA, menyebabkan EB terikat dengan DNA. Penyerapan cahaya ultraviolet 260 nm oleh DNA dipindahkan ke EB, dan EB terikat memancarkan pendarfluor pada 590 nm di kawasan merah-oren spektrum cahaya yang boleh dilihat. Mewarna gel dalam larutan 1 mmol/L MgSO4 selama 1 jam boleh mengurangkan pendarfluor latar belakang yang disebabkan oleh EB yang tidak terikat, memudahkan pengesanan sejumlah kecil DNA.
Pewarna EB mempunyai beberapa kelebihan: ia mudah digunakan, tidak memecahkan asid nukleik, mempunyai kepekaan yang tinggi, dan boleh mengotorkan kedua-dua DNA dan RNA. EB boleh ditambah pada sampel dan dijejak menggunakan penyerapan UV pada bila-bila masa. Selepas pewarnaan, EB boleh dikeluarkan dengan pengekstrakan dengan n-butanol.
Walau bagaimanapun, pewarna EB adalah mutagen yang kuat, dan langkah berjaga-jaga, seperti memakai sarung tangan polietilena, harus diambil semasa pengendalian. Oren acridine juga merupakan pewarna yang biasa digunakan kerana ia boleh membezakan antara asid nukleik untai tunggal dan rantai dua (DNA, RNA). Ia mempamerkan pendarfluor hijau (530 nm) untuk asid nukleik berstrand dua dan pendarfluor merah (640 nm) untuk asid nukleik berstrand tunggal. Selain itu, pewarna lain seperti biru metilena, hijau metilena, dan kuinolin B boleh digunakan untuk pewarnaan.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) mempunyai pengkhususan dalam pembuatan instrumen elektroforesis selama lebih daripada 50 tahun dengan pasukan teknikal profesional dan pusat R&D kami sendiri. Kami mempunyai barisan pengeluaran yang boleh dipercayai dan lengkap dari reka bentuk hingga pemeriksaan, dan gudang, serta sokongan pemasaran. Produk utama kami ialah Sel Elektroforesis (tangki/ruang), Bekalan Kuasa Elektroforesis, Transilluminator LED Biru, Transilluminator UV, Sistem Imej & Analisis Gel dll.
Kami kini sedang mencari rakan kongsi, kedua-dua tangki elektroforesis OEM dan pengedar dialu-alukan.
Jika anda mempunyai sebarang pelan pembelian untuk produk kami, sila jangan teragak-agak untuk menghubungi kami. Anda boleh menghantar mesej kepada kami melalui e-mel[e-mel dilindungi]atau[e-mel dilindungi], atau sila hubungi kami di +86 15810650221 atau tambah Whatsapp +86 15810650221, atau Wechat: 15810650221.
Sila Imbas kod QR untuk ditambahkan pada Whatsapp atau WeChat.
Masa siaran: Dis-20-2023