1. Pengelasan
Elektroforesis gel dibahagikan kepada jenis menegak (termasuk gel lajur dan gel papak) dan jenis mendatar (terutamanya gel papak) (Rajah 6-18). Secara amnya, pemisahan menegak sedikit lebih tinggi daripada mendatar, tetapi penyediaan gel mendatar mempunyai sekurang-kurangnya empat kelebihan: terdapat sokongan di bawah keseluruhan gel, membenarkan penggunaan agarose berkepekatan rendah; adalah mungkin untuk menyediakan plat gel agarose dengan spesifikasi yang berbeza; penyediaan gel dan pemuatan sampel lebih mudah; ruang elektroforesis mudah dibina dan kos efektif. Oleh kerana elektroforesis mendatar dilakukan dengan plat gel agarose terendam sepenuhnya kira-kira 1mm di bawah permukaan penimbal elektroforesis, ia juga dipanggil elektroforesis tenggelam.
Tangki Elektroforesis DYCP-31DN untuk elektroforesis gel agarose
2.Sistem Penampan
Dalam pengasingan asid nukleik, kebanyakan sistem menggunakan sistem berterusan. Penampan elektroforesis yang biasa digunakan termasuk TBE (0.08mol/L Tris·HCl, pH 8.5, 0.08mol/L asid borik, 0.0024mol/L EDTA) penimbal dan THE (0.04mol/L Tris·HCl, pH 7.8, 0.02mol/L natrium asetat, penimbal 0.0018mol/L EDTA). Penampan ini biasanya disediakan sebagai larutan stok 10x dan dicairkan kepada kepekatan yang diperlukan apabila digunakan. Kadar migrasi DNA linear dan bulat dalam gel agarose berbeza dengan penimbal yang digunakan. Dalam penampan THE, kadar penghijrahan DNA linear adalah lebih besar daripada DNA bulat, manakala dalam penimbal TBE, sebaliknya adalah benar.
3.Penyediaan Gel Agarose
(1) Penyediaan Gel Agarose Mendatar
(a) Sediakan kepekatan gel agarose yang diperlukan menggunakan penimbal elektroforesis 1x.
(b) Panaskan agarose untuk menyelesaikan pembubaran sama ada dalam mandi air mendidih, pada pengacau magnet, atau dalam ketuhar gelombang mikro. Sejukkan larutan agarose hingga 55°C dan tambahkan pewarna etidium bromida (EB) kepada kepekatan akhir 0.5 μg/ml.
(c) Tutup tepi kaca atau plat akrilik dengan sedikit gel agarose, tambah sikat, dan letakkan gigi sikat kira-kira 0.5~1.0 mm di atas plat.
(d) Tuangkan larutan gel agarosa cair secara berterusan ke dalam acuan plat kaca atau akrilik (ketebalan bergantung kepada isipadu sampel DNA), mengelakkan kemasukan gelembung udara. Biarkan ia memejal secara semula jadi pada suhu bilik.
(e) Keluarkan sikat dengan berhati-hati selepas pemejalan lengkap. Tambahkan jumlah penimbal elektroforesis yang sesuai pada tangki gel, pastikan plat gel terendam kira-kira 1 mm di bawah permukaan penimbal elektroforesis.
(2) Penyediaan Gel Agarose Menegak
(a) Keluarkan gris atau sisa dari plat kaca dengan mencuci dengan etanol.
(b) Letakkan plat pengatur jarak antara empangan hadapan dan belakang, selaraskan tepi plat pengatur jarak dengan empangan hadapan dan belakang, dan kencangkannya dengan pengapit.
(c) Tambahkan 2% agarose dalam 1x penimbal di antara tepi plat pengatur jarak untuk membentuk palam agarosa setinggi 1 cm di bahagian bawah kebuk tuangan gel.
(d) Tuangkan gel agarosa cair pada kepekatan yang dikehendaki, disediakan dalam 1x penimbal, ke dalam ruang gel sehingga 1 cm di bawah bahagian atas.
(e) Masukkan sikat, elakkan memerangkap gelembung udara di bawah gigi sikat. Kadangkala, kedutan mungkin muncul pada gigi sikat semasa penyejukan gel agarose; dalam kes sedemikian, hanya tambah beberapa agarose cair di bahagian atas untuk menguatkannya.
(f) Tanggalkan sikat. Untuk mengelakkan kebocoran penimbal dalam slot pemuatan, tutup sambungan antara plat gel agarosa dan ruang elektroforesis dengan agarose 2% dan tambahkan jumlah penimbal yang diperlukan.
(g) Tambah 1x penimbal elektroforesis ke ruang gel.
(h) Berhati-hati memuatkan sampel DNA ke dalam gel agarose di bawah penimbal.
Maklumat lanjut tentang pengetahuan asas tentang elektroforesis gel agarose, kami akan kongsikan minggu hadapan. Semoga maklumat ini berguna untuk percubaan anda.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) mempunyai pengkhususan dalam pembuatan instrumen elektroforesis selama lebih daripada 50 tahun dengan pasukan teknikal profesional dan pusat R&D kami sendiri. Kami mempunyai barisan pengeluaran yang boleh dipercayai dan lengkap dari reka bentuk hingga pemeriksaan, dan gudang, serta sokongan pemasaran. Produk utama kami ialah Sel Elektroforesis (tangki/ruang), Bekalan Kuasa Elektroforesis, Transilluminator LED Biru, Transilluminator UV, Sistem Imej & Analisis Gel dll.
Kami kini sedang mencari rakan kongsi, kedua-dua tangki elektroforesis OEM dan pengedar dialu-alukan.
Jika anda mempunyai sebarang pelan pembelian untuk produk kami, sila jangan teragak-agak untuk menghubungi kami. Anda boleh menghantar mesej kepada kami melalui e-mel[e-mel dilindungi]atau[e-mel dilindungi], atau sila hubungi kami di +86 15810650221 atau tambah Whatsapp +86 15810650221, atau Wechat: 15810650221.
Sila Imbas kod QR untuk ditambahkan pada Whatsapp atau WeChat.
Masa siaran: Dis-07-2023